重点阐述PCR技术特点
聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是一项利用 DNA 双链复制原理，在生物体外复制特定 DNA 片段的的核酸合成技术。可在短时间内大量扩增目的 DNA 片段，而不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。DNA 的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链 DNA 在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在 DNA 聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现，DNA 在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制 DNA 的变性和复性，加入设计引物，DNA 聚合酶，dNTP 就可以完成特定基因的体外复制，这是 PCR 的理论基础。
一、反应体系
PCR 反应是在体外模拟 DNA 的复制过程，因此反应体系中必须具有 DNA 复制所需的基本要素：
1、模板（template），含有需要扩增的 DNA 片段。
2、引物（primer），一对引物决定了需要扩增的起始和终止位置。
3、聚合酶（polymerase ），DNA 聚合酶复制需要扩增的区域。
4、脱氧核苷三磷酸（dNTP），用于构造新的互补链。
5、缓冲液（buffer），提供适合聚合酶行使功能的化学环境。
二、技术特点
1、灵敏度高
PCR 产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克（pg = 10-12）量级的起始待测模板扩增到微克（μg=-6）水平。能从 100 万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR 的灵敏度可达 3 个 RFU（空斑形成单位）；在细菌学中最小检出率为 3 个细菌。
2、特异性强
PCR 反应的特异性决定因素：
引物与模板 DNA 特异正确的结合；
碱基配对原则；
Taq 聚合酶合成反应的忠实性；
靶基因的特异性与保守性。
3、简便、快速
只需要一次性将反应液加好后，就可以进行扩增。一般 2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
4、纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及 RNA 均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗漱液、毛发、细胞、活组织等 DNA 扩增检测。
