ELISA试剂盒试验“边缘效应”排除方法指南
ELISA试剂盒试验“边缘效应”排除方法指南是最常用的标记免疫分析技术之一。它基于一种酶标记抗体，能够检测固定在96孔或384孔酶标板上的抗原，加入的底物可以产生与原始样品中存在的抗原量相关的颜色变化或光信号。这是一种简单而快速的技术，用于检测附着在固体表面的抗体或抗原。
在使用ELISA试剂盒的实验测定的时候，常发现有“边缘效应”，也就是外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应”，并且可提高测定的重复性。
1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
4． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
5． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
6． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
7． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
8． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里。
9． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
10． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
11． 加入试剂的顺序应一致，保证所有反应板孔温育的时间一样。
12． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
