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解析ELISA显色淡的原因

解析ELISA显色淡的原因：

原因1：试剂盒在运输途中时间太长，温度太高。

解决方案：尽量缩短运输时间，夏季应放冰块降温。

原因2：培养箱温度不足37℃。

解决方案：注意培养箱温度，放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定，非隔水式培养箱尤其应注意。

原因3：保温时间不足。

解决方案：校正定时钟准确定时。

原因4：试剂盒未充分平衡。

解决方案：试剂盒从2～8℃冰箱取出后打开盒盖，于室温平衡至少20分钟，确保所有试剂已平衡至室温（约25℃）。

原因5：洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加。

解决方案：按说明书要求保留洗涤时间，准确记住洗涤次数。

原因6：蒸馏水水质有问题。

解决方案：使用新鲜合格的蒸馏。

原因7：移液器吸液量不足，吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁。

解决方案：校正移液器，吸嘴要配套，装吸嘴时要紧密，吸嘴内壁要清洁，一次性使用。

原因8：底物作用时间不足。

解决方案：准确定时。

显色一定要控制时间，根据试剂盒说明操作即可。一般来说，显色时间过短，结果偏低；显色时间过长，空白增高或者非特异性显色增加。