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ELISA检测目的及基本原理

ELISA即酶联吸附试验，是一种常用的固相酶免疫测定方法。Engvall 和Perlmann于1971年最先应用该法进行了IgG定量测定，并命名为"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。
ELISA免疫检测的目的：
1.测定体液中的各种蛋白质，包括含量极少的蛋白质如甲胎蛋白等；
2.测定激素，包括小分子量的甾体激素等；
3.测定抗生素和药物；
4.测定病原体抗原，HBsAg、HBeAg等；
5.利用纯化的抗原检测标本中的抗体，例如抗-HBs等；
ELISA的基本原理：
1、使抗原（或抗体）结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性；
2、使抗原（或抗体）与某种酶联结成酶标 抗原（或抗体），而且此酶标抗原（或抗体）既保留其免疫活性，又保留其酶活性；
3、测定时将受检标本（抗体或抗原）和酶标抗原（或 抗体）按不同步骤与固相载体表面的抗原或抗体进行反应，再用洗涤方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开，最后结合 在固相载体上的酶量与标本中受检的抗体或抗原量成一定比例；再加入酶反应底物后，底物被酶催化后变为有色产物，根据其颜色反应的 深浅进行定性或定量分析，以了解被测标本中抗体或抗原含量。
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在中 除正常反应外，有时常可见到一些错误结果（即假阳性或假阴性结果）。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：①标本因素；②试剂因素；③操作因素。