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细胞流式检测说明
流式细胞术是一种在液体系统中,测定单个细胞或细胞器的生物、物理和化学特性,并根据这些特性将所需要的细胞或细胞器进行定量分析和分选的技术。它是一种可以检测细胞或者生物学颗粒的多种特性的技术,用来了解细胞群的均值和分布情况,并还可以分选感兴趣的细胞、对该细胞做进一步的培养研究。
分析型流式细胞仪(BD FACSCalibur)—只检测不再培养,细胞样本分析后进入废液桶,不能回收利用。
分选型流式细胞仪(FACSAriaII)—检测后培养既能流式分析,还能对分析的目的细胞进行分选。
技术流程 :
1、 样品制备:对于不同组织来源的实体组织和实体瘤标本,应该根据各自特点选择不同的分散细胞方法,以期达到单细胞产量高、损伤小的目的。如酶消化法、机械法等;
2、 荧光标记:荧光素偶联抗体标记、荧光染料/荧光化合物标记、荧光蛋白;
3、 流式分析:根据客户需要设置空白对照、阳性对照、同型对照进行实验;
4、 结果分析:根据客户需要提供散点图、直方图、等高线图等。
研究对象:
动植物细胞、微生物、细菌等生物体及其中的DNA、蛋白质、塑料微球或微粒,还包括塑料微球或其他悬浮于液体中的微粒。
检测范围:
细胞结构:细胞大小;细胞颗粒度;细胞表面积;核浆比例;DNA含量与细胞周期;蛋白质含量
细胞功能:细胞表面/胞浆/核的特异性抗原;细胞活性;细胞内外的细胞因子;激素结合位点;细胞受体;蛋白磷酸化;pH值;钙离子浓度;细胞膜电位/线粒体膜电位
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