培养细胞的生命期及体外培养的细胞生长过程
动物细胞培养是用无菌操作的方法从动物体分离得到细胞,将它们置于模拟动物体内生理条件的人工环境中,在体外进行培养并使其继续生长的过程。人们借以该技术可以观察细胞的生长、繁殖、细胞分化以及细胞衰老等生命现象。动物细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。
培养细胞的生命期:
指细胞在培养过程中持续增殖和生长的时间。在培养体系中,单个细胞表现有很大的独立性。但一个有活力的细胞必须通过细胞周期进行倍增,繁殖成群体,群体细胞是培养细胞的基本存在形式,而且在形态和机能上相互依存。
单个细胞生长周期(细胞周期):
细胞生长包括DNA合成和细胞分裂两个重要阶段。细胞周期即一个母细胞分裂形成两个子细胞的全过程,可分为间期(G1+S+G2)和分裂期(M期)。在间期,细胞完成生长过程,主要是DNA合成。M期为有丝分裂期,此时每个细胞分裂为2个细胞。在M期主要完成的是遗传物质的分配过程。
细胞系的生长过程:
取自动物并进行体外培养的细胞在其传代培养之前被称为原代细胞,当细胞维持一段时间的生长,达到一定密度以后就要被分离为2个或者多个培养皿培养,这个过程为传代培养,传代以后生长的细胞便是细胞系。
.png)
体外培养的细胞生长过程一般为3个阶段:
1)、原代培养期(约为 1~4 周)
细胞移动活跃,但分裂不旺盛,多呈二倍体核型。原代细胞与体内原组织形态结构和功能活动基本相似。各细胞的遗传性状互不相关,细胞相互依存性强,如果把这种细胞稀释分散成单细胞,在软琼脂培养基中进行培养,细胞克隆的形成率下降,表明细胞独立生存性差。
2)、传代期
细胞增殖旺盛,并维持二倍体核型,也叫二倍体细胞系。为了保存二倍体细胞性质,细胞应在初代或传代早期冻存为好。传代大约数天至一周可重复一次,持续数月,即为细胞系,一般为有限细胞系。
3)、衰退期
细胞仍生长,增殖减慢,不增殖,进而衰退凋亡。
注意:细胞在三期中的任何一期(一般发生在传代后期或衰退期)在某些因素影响下,
如血清质量不佳、病毒污染、温度和 pH 不稳等,细胞可能发生自发转化。
细胞可能获得永生性。细胞获得持久性的增殖能力,这样的细胞群体称为连续细胞系。而细胞获得不死性后,细胞核型大多变成异倍体接触抑制消失。至今,国际以及国内已经建立了许多细胞系,大多数来自肿瘤细胞。


