人ELISA试剂盒竞赛法的扼要操作过程
当小分子抗原或半抗原因缺少可作夹心法的两个以上的抗体位点，因而不能用双抗体夹心法进行测定，能够选用竞赛法形式。经洗刷后分成两组：一组加酶符号抗原和被测抗原的混合
液，而另一组只加酶符号抗原，再经孵育洗刷后加底物显色，这两组底物降解量之差，即为所要测定的不知道抗原的量。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。
人ELISA试剂盒竞赛法的扼要操作过程：
1. 以稀释液将待检标本做适当稀释（预试中确定）加入包被有已知抗原的酶标板中（50ul/孔），加封口胶带于37℃作用30min。
2. 弃反应液，以冲洗液连续洗板5次并于吸水纸上拍干。
3. 加入酶标抗体（浓度在预试中确定）。加封口胶带后于37℃作用30min。
4. 重复第2步。
5. 加底物（浓度在预试中确定），加封口胶带后于室温下避光作用5-60 min，其间不时观察，显色满意后加终止液50ul/孔。
6. 于酶标仪测定OD值，OPD用492nm测定，TMB用450nm测定。
注意事项
1. 每次实验均应做阴性对照、阳性对照及空白对照（以PBS代替标本），后者为本底值，在分析实验结果时应扣除本底值，阳性对照<阴性对照<空白对照实验成立。
2. 一般认为小分子抗原宜用本法检测，而大分子抗原则宜采用夹心法检测，但具体宜采用哪种方法应根据试验决定，本发与夹心法相比在操作上减少一步。包被抗体与酶标抗体如果分别采用单克隆抗体和多克隆抗体时，宜用单克隆抗体作为包被抗体，以多克隆抗体作为酶标抗体。
3. 血清标本中抗原浓度一般较低，故一般用原倍标本进行检测，必要时可进行稀释测定，但应重新摸索酶标抗原的浓度，以确保方法的灵敏性。
4. 以酶标记抗原的方法同酶标记抗体。
5. 其它注意事项同酶联免疫间接法。
