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白细胞介素-8(IL-8)洗板方法
实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中白细胞介素-8(IL-8)水平。用纯化的白细胞介素-8(IL-8)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素 -8(IL-8),再与HRP 标记的白细胞介素-8(IL-8)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素-8(IL-8)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中白细胞介素-8(IL-8)含量。 洗板方法 1.手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。 2.自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。 标本的采集及保存 1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 3.其它生物标本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
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