多克隆抗体技术详细介绍
抗原影响机体，发生免疫学反响，由机体的浆细胞组成并分泌的与抗原有特异性结合才能的一组球蛋白，这就是免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合才能的免疫球蛋白就是抗体。
抗原通常是由多个抗原决定簇组成的，由一种抗原决定簇影响机体，由一个B淋巴细胞承受该抗原所发生的抗体称之为单克隆抗体（Monclone antibody）。由多种抗原决定簇影响机体，相应地就发生各式各样的单克隆抗体，这些单克隆抗体稠浊在一起就是多克隆抗体，机体内所发生的抗体就是多克隆抗体；除了抗原决定簇的多样性以外，相同一类抗原决定簇，也可影响机体发生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。
二、免疫动物
供免疫用的动物主要是哺乳动物和禽类，常挑选家兔、绵羊、山羊、马、骡和豚鼠及小鼠等。动物的挑选常依据抗体的用处和量来决定，也与抗原的性质有关。如要取得很多的抗体，多选用大动物；如要是取得直接符号确诊的抗体，则直接选用本动物；如要取得直接的符号确诊用抗体，则必须用异源动物制备抗体；假如难以取得的抗原，且抗体的需求量少，则能够选用纯系小鼠制备；一般实验室选用的抗体，多用兔和羊制备。
免疫用的动物能够挑选适龄的健康雄性动物，雌性动物特别是妊娠动物用于制备免疫抗体则十分不合适，有时甚至不发生抗体。因为对免疫应对的个别差异，免疫时应同时选用数只动物进行免疫。
抗原是多种多样的，并且千差万别。就其化学成分而言，有蛋白质抗原、类脂抗原、多糖类抗原和核酸抗原等。就抗原性而言，有彻底抗原和不彻底抗原。为了取得较好的抗血清，能够是选用蛋白质抗原，如要制备用于挑选细菌表达的cDNA文库或免疫印迹的抗血清，选用可降解的蛋白质抗原。不同的抗原，其免疫原性的强弱均不相同，这种免疫原性的强弱取决于抗原的分子量、化学活性基团、立体结构、物理形状和弥散速度等。
抗原的免疫剂量是按照给予动物的品种、免疫周期以及所要求的抗体特性等不同而不同。剂量过低，不能引起满足强的免疫影响，免疫剂量过多，有可能引起免疫耐受。在必定的范围内，抗体的效价是随打针剂量的添加而增高。蛋白质抗原的免疫剂量比多糖类抗原宽。一般来说，小鼠的初度免疫剂量为50μg～400μg/次，大鼠为100μg～1 000μg／次，兔为200μg～1 000μg/次。加强计量为初度剂量的1／5～2／5。
免疫剂量与打针途径有关，一般来说，静脉打针剂量大于皮下打针，而皮下打针又比掌内和跖内皮下打针剂量大，也可选用淋巴结内打针法。加佐剂比不加佐剂的打针剂量要小，对家兔而言，选用弗氏彻底佐剂，则需打针0.5mg～1mg/kg./次，如选用弗氏不彻底佐剂则打针剂量应大10倍以上。如要制备高度特异性的抗血清，可选用低剂量抗原短程免疫法。如需求取得高效价的抗血清，宜选用大剂量长程免疫法。免疫周期长者，可少数屡次。免疫周期短者，应很多少次。
两次打针的间隔时间应长短适宜，太短起不到再次反响的效果，太长则失去了前一次激起的灵敏效果。一般间隔时间应为5~7天，加佐剂者应为2周左右。
打针的Ig纯度高，则一般不易引起过敏反响，如打针血清，即使是少数，在再次免疫时，极易引起过敏反响，所以必定要采取办法。
三、佐剂的使用
对可溶性抗原而言，为了增强其免疫原性或改动免疫反响的类型、节约抗原等意图，常选用加佐剂的方法以影响机体发生较强的免疫应对。
1、佐剂的类型现在实践中常使用的佐剂有氢氧化铝胶、明矾、弗氏佐剂、脂质体和石蜡油等。也有选用结合杆菌等分枝杆菌、白喉杆菌以及细小棒状杆菌等。
（1）弗氏不彻底佐剂（incomplete Freund's adjuvant，IFA）
羊毛脂1 份
石蜡油5 份
混合，高压灭菌后保存。用时加热消融，冷却至50℃左右，加抗原进行乳化处理。
（2）弗氏彻底佐剂（complete Freund's adjuvant，CFA）
弗氏不彻底佐剂10ml
卡介苗10mg～200mg
卡介苗可100℃10min灭活处理。
初度免疫时，能够用弗氏彻底佐剂，以影响机体发生较强的免疫反响。再次免疫时，一般不必彻底佐剂，而选用弗氏不彻底佐剂。但在研讨分枝杆菌及相关抗原时，一般不必弗氏彻底佐剂，避免卡介苗的搅扰。
