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为预防ELISA试剂的交叉污染,可以怎样做
预防ELISA试剂交叉污染,核心是做好实验环境清洁、规范操作流程、严格管理试剂。具体可以这样做:
1.保持实验环境清洁
定期对实验室进行消毒,确保台面、仪器无灰尘和细菌残留。实验前用75%酒精擦拭台面,实验后及时清理,避免试剂残留。
2.规范操作流程
使用一次性耗材:移液枪头、离心管等必须一次性使用,避免重复使用导致污染。
正确使用移液器:选择量程合适的移液枪,加样时避免产生气泡,不同样本更换枪头,防止交叉污染。
严格洗涤:洗板是降低背景的关键,确保每孔洗涤液注满并浸泡足够时间(建议30秒),手工洗板时拍干力度适中,使用洗板机需定期维护针头。
3.严格管理试剂
试剂分装保存:将试剂分装成小份,避免反复冻融导致蛋白变性。
注意试剂有效期:使用前检查试剂是否在有效期内,过期试剂需废弃。
避免试剂污染:不同试剂使用专用容器,避免混用。加样时避免液体溅出,封板膜不可重复使用。
4.其他注意事项
样本处理:血清样本避免溶血,采集后静置充分再离心,分装后-80℃保存。
实验设计:设置阴阳性对照,批内CV应<10%,批间CV<15%。
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