影响蛋白质沉淀盐析法主要因素
蛋白质通过盐析的办法沉淀的原理是降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出。蛋白质的沉淀（protein precipitation），沉淀是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程。蛋白质从溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。蛋白质沉淀常用的方法有盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、生物碱试剂与某些酸沉淀等。
在生化制备中，沉淀主要用于浓缩目的，或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制备中常用的盐析法多用于各种蛋白质和酶的分离纯化。
一般来说，所有固体溶质都可以在溶液中加入中性盐而沉淀析出，这一过程叫盐析。在生化制备中,许多物质都可以用盐析法进行沉淀分离，如蛋白质、多肽、多糖、核酸等，其中以蛋白质沉淀最为常见，特别是在粗提阶段。
盐析法分为两类:
第一类叫Ks分段盐析法，在一定PH和温度下通过改变离子强度实现，用于早期的粗提液；
第二种叫b分段盐析法，在一定离子强度下通过改变PH和温度来实现，用于后期进一步分离纯化和结晶。
蛋白质沉淀盐析法是利用盐析来分离和纯化蛋白质的一种方法，其影响因素主要包括：
1. 盐的类型和浓度：
1) 常用的盐有硫酸铵、硫酸镁、硫酸钠和氯化钠等。
2) 不同的蛋白质对盐的浓度要求不同，需要通过实验确定最适宜的盐浓度。
3) 硫酸铵因其良好的分段盐析效果和不易引起蛋白质变性的特点而被广泛应用。
2. 溶液pH值：
1) 在蛋白质的等电点时，盐析效果较好，因为此时蛋白质的溶解度最低。
2) pH值影响蛋白质的电荷状态，进而影响盐析的效果。
3. 温度：
1) 一般情况下，盐析可以在室温下进行，但某些对温度敏感的蛋白质可能需要在低温下操作。
2) 温度会影响蛋白质的溶解度和盐的溶解度，因此在盐析过程中需要控制温度。
4. 蛋白质浓度：
1) 蛋白质浓度较高时，盐析可能导致共沉现象，即目标蛋白质与非目标蛋白质一起沉淀。
2) 在盐析前，可能需要稀释蛋白质溶液以避免共沉。
5. 盐析过程中的操作条件：
1) 盐的添加速度和搅拌速度也会影响盐析效果，需要根据具体情况进行调整。
2) 有时需要分段加入盐，以逐步改变溶液的离子强度，实现分步沉淀不同蛋白质的目的。
6. 后续处理：
1) 盐析后，需要将蛋白质中的盐去除，常用的方法包括透析、凝胶过滤或盐洗脱等。
2) 这一步骤对于保持蛋白质的生物活性和纯度至关重要。
通过控制这些因素，可以有效地利用盐析法从复杂混合物中分离和纯化目标蛋白质。
