网站信息

冻存原代细胞的培养过程

       原代细胞(primary cell)是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞，称为原代细胞。即原代细胞是指从机体取出后立即培养的细胞。一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。冻存原代细胞的培养：

1.将一管细胞从液氮罐中取出，注意保护手和眼睛。

2.将冻存管快速的放入37℃水浴中，轻轻握住并旋转，直到管内物体*融化。

3.将冻存管立即从水浴中拿出，擦干，转入无菌环境。

4.用70%的酒精冲洗冻存管，然后擦去多余酒精。

5.打开盖子，注意手指不要碰到里面的螺纹(注意，由于冻存管有负压，开盖时可能会有少量溢出，这是正常现象)。

6.用多聚赖氨酸包被培养瓶。多数细胞推荐的接种密度为每平方厘米5000个细胞。

7.盖好培养瓶的盖子，轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。

8.将培养瓶放入培养箱中。

　　9.放入培养箱后第6-16小时更换一次培养基，以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。