关于PCR仪使用重点说明
一、PCR仪定义：
通过PCR（聚合酶链式反应）技术，对特定DNA进行扩增的仪器。
普通PCR仪：只进行PCR扩增的PCR仪，实际上是一个温控设备。普通PCR仪只能实现DNA的扩增，分析检测需要在扩增之后。而扩增后到检测分析的这个过程，因为要将样品中仪器中取出来，所以容易受到污染，同时也容易污染环境。
实时荧光PCR仪：在普通PCR仪的基础上增加荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。在作为温控设备的同时加入荧光分析系统。
在扩增的同时，通过前期准备工作的时候，PCR扩增体系中加入荧光集团，而后通过荧光信号采集系统实时采集，存储数据，将检测分析步骤集中到仪器上，减少人员后续的检测操作，降低了污染和被污染的风险。
二、PCR仪工作原理：
下面的步骤是PCR的反应原理，同时也是PCR仪的工作原理。
简单的说，就是通过高温变性，退火复性，延伸复制三个部分。
双链DNA在一定的环境中，通过在90-95℃变性，形成单链，然后退火降温到40-60℃，
在引物及其他辅助因子的作用下，使其初步结合，再快速升温至70-75℃，在相关酶的催化作用下，合成双链。完成一个扩增循环。
由此我们也可以得出PCR仪的一个主要参数：温度，温度示值是否准确，升温速率的快慢是影响其的一个主要因素。
具体要加什么缓冲液，要加什么引物，以及其他一些辅助因子，后续我们再去了解。
三、PCR仪的校准参数：
我们上面提到了反应的原理，由此我们可以简单的推断：温度作为变性-复性-延伸的基本设置，这个是我们需要校准的一个项目。
那么在反应的过程中，温度示值与设定值是否准确，我们需要知道。这是第一个温度示值误差；因为我们需要升温，降温，升温，这是不是涉及到一个速率的问题，升降温的快慢，会直接影响到整个反应过程，所以，升降温速率也是我们需要考量的一个方向。仪器通过加热模块去控制温度，在快速升降温的过程中，仪器不可避免的会先升高/降低温度之后，再达到所设定的问题，这就是温度的过冲，这也是可能也是一个考量的指标。达到一定的温度之后，仪器要平衡一段时间（所设定的时间），而温度平衡的时间和设置的时间，是否一致，也是要考虑的一个方向。不同的DNA模板，需要的温度和解链的时间不一样，如果解链的时间没达到要求，DNA没有完全变性，在降温复性的过程中，会恢复到天然的状态。
PCR仪有48孔、96孔，384孔，每一个孔都可以放一个样品，自然我们上面所说的温度参数，还是有一些不全。这里大致总结一下：温度示值误差、温度均匀性、温度最大冲量、温度持续时间准确度、平均升降温速率，最大升降温速率等。
四、PCR仪用途：
简单的来说，就是所采集到的样品含量太低，无法正常的用仪器进行检测分析，所以需要通过PCR仪PCR技术来实现样品扩增。扩增的倍数2N次方。2-4-8-16-32-64-128-256······
通过这个技术，可以用于分子生物学研究：核酸定量分析，基因表达差异分析等等。医学研究：产前诊断，病原体检测如最近的新冠病毒等等方面。
